Invitrogen Zeocin 博莱霉素（Sh ble基因筛选抗生素）

作者：王韵壹、李英、熊慧卿

【温馨提示】：如果你对市场上常见中文名都叫【博莱霉素】，但英文名又不同的一些产品感到有所迷惑，可参考我司【懋康生物】整理的Bleomycins (BLMs) 博莱霉素家族常用抗生素成员的应用选择，也许有所收获。

博莱霉素家族常见产品：

筛选抗生素：Zeocin【冻干粉】 Zeocin【100mg/ml】 Phleomycin 腐草霉素

细胞功能研究：Bleomycin Sulfate 硫酸博莱霉素 Bleomycin A5 Hydrochloride 盐酸博莱霉素A5

产品关键词：

Zeocin 博莱霉素（博来霉素）；Phleomycin 腐草霉素；Sh ble基因；Streptomyces verticillus 轮枝链霉菌；Hygromycin B 潮霉素B；G418遗传霉素；CAS NO.：11006-33-0

基本描述：

Zeocin™是博来霉素/腐草霉素（bleomycin/phleomycin）抗生素家族的成员之一，从轮枝链霉菌Streptomyces verticillus中分离得到，对细菌、真菌（包括酵母菌）、植物和哺乳动物细胞具很强的毒性。来自Streptoalloteichus hindustanus的Sh ble基因赋予Zeocin抗性。

Zeocin™是腐草霉素D1的商业名称，一种碱性、水溶性、铜离子螯合的糖肽抗生素。铜离子的存在使得溶液为蓝色，此铜螯合的形式为无活性。一旦进入细胞后，二价铜离子（Cu2+）被还原为一价铜离子（Cu+），并被细胞内的巯基化合物去除。铜离子被去除后，Zeocin™被活化，嵌入DNA使其断裂，最终导致细胞死亡。

抗性基因：

Zeocin™抗性由编码一种13,665Da大小蛋白的Sh ble基因（Streptoalloteichus hindustanus bleomycin gene）赋予，该蛋白化学计量方式结合Zeocin™，抑制其DNA双链切割活性。因此，能表达此蛋白的真核和原核宿主细胞被赋予Zeocin™抗性。

基本特性：

1）CAS NO.：11006-33-0

2）化学式：C55H83N19O21S2Cu

3）分子量：1137.41 g/mol

4）外观：蓝色溶液（100mg/ml in deionized，autoclaved water）

5）运输：冰袋运输

6）保存：-30°C~-10°C，至少1年有效

7）大肠杆菌筛选：25-50μg/mL（低盐LB培养基，NaCl浓度不能超过5g/L）

8）酵母菌筛选：50-300μg/mL（YPD或基本培养基）

9）哺乳动物细胞筛选：50-1000μg/mL（合适培养基，根据细胞系而不同）

注意事项：

1）Zeocin™对光敏感，需将抗生素，或含该抗生素的平板或培养基置于黑暗处。

2）降低细菌培养基的盐浓度，调整pH到7.5使其保持活性，因高离子强度和酸或碱性都会抑制Zeocin™活性；

3）储存Zeocin™在-30°C~-10°C，使用前需冰上融化。

4）Zeocin™有毒，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法（应用举例）：

1）大肠杆菌（E. Coli.）

宿主：不能包含Tn5转座子（比如：Top10，DH5，DH10）

培养基：使用低盐LB（10g Trypton，5g NaCl，5g Yeast extract），pH 7.5，防止Zeocin™失活

选择浓度：25-50μg/mL用于大肠杆菌筛选

2）酵母菌（Yeast）

宿主：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）,毕赤酵母（Pichia pastoris）